益生菌家族“家大業(yè)大”,市面上大部分產(chǎn)品使用的菌種少則兩種,多則十幾種。復(fù)合菌劑中的菌株構(gòu)成及貯藏期各菌株活菌量,是其產(chǎn)品質(zhì)量、能否發(fā)揮功效的關(guān)鍵。近日,湯臣倍健聯(lián)合中國食品發(fā)酵工業(yè)研究院共同牽頭開展復(fù)合菌劑中單菌種活菌檢測方法系列研究,研究的首輪成果出爐,相關(guān)論文發(fā)表在權(quán)威期刊《Frontiers in Microbiology》。

該技術(shù)方法團體標準經(jīng)中國食品科學(xué)技術(shù)學(xué)會發(fā)布,為全球范圍內(nèi)首個將PMA-qPCR技術(shù)應(yīng)用于食品用菌種活菌定量檢測的標準方法。

研究發(fā)現(xiàn),益生菌的有益作用具有菌株特異性且與攝入的活菌數(shù)量密切相關(guān),不同菌株發(fā)揮作用所需的活菌數(shù)量不同,復(fù)合菌株的協(xié)同作用也有科學(xué)的量效關(guān)系。

然而,由于不同益生菌菌種的基因序列構(gòu)成相似且復(fù)雜,在復(fù)合菌劑中想要排除其它菌種的干擾對目標菌種進行精準計數(shù),存在技術(shù)難度,業(yè)內(nèi)一直缺乏復(fù)合菌劑中單一菌種的活菌檢測標準技術(shù)。

為助力益生菌市場發(fā)展,2022年,由湯臣倍健、中國食品發(fā)酵工業(yè)研究院發(fā)起,聯(lián)合山西大學(xué)、丹尼斯克(中國)、蒙牛、科拓生物等權(quán)威機構(gòu)和領(lǐng)先企業(yè)成立項目組,開展復(fù)合菌劑中單菌種的活菌檢測-PMA-qPCR系列研究,并聯(lián)合申報系列團體標準,對方法進行標準化。

項目組通過對篩選的引物進行包容性及排他性驗證,證實該技術(shù)方法中所選用的引物不會將非目標菌種納入計數(shù),達到區(qū)分測定的目的。同時,采用PMA結(jié)合qPCR技術(shù),通過PMA抑制死菌擴增,能更加高效、精準地檢測出目標菌種的活菌數(shù)。

此次研究實現(xiàn)了復(fù)合益生菌產(chǎn)品中鼠李糖乳酪桿菌的精準鑒定和活菌計數(shù),在復(fù)合菌種檢測領(lǐng)域具有里程碑意義。而項目組依據(jù)國內(nèi)外方法學(xué)驗證指南,也對所建立的方法體系實現(xiàn)了有效驗證。據(jù)悉,項目組后續(xù)會以此技術(shù)體系成果為基礎(chǔ),開展常見復(fù)合食品用菌種的標準化方法系列研究。

中國食品發(fā)酵工業(yè)研究院副院長姚粟表示,對食品用菌種開展精準鑒定和活菌定量,建立適合產(chǎn)業(yè)應(yīng)用的快速、精準的復(fù)合菌種的鑒定及活菌檢測技術(shù)標準化體系,一直是益生菌行業(yè)的重要研究方向。此次技術(shù)方法的標準化突破,有望為產(chǎn)品質(zhì)量評價提供更豐富的依據(jù),為行業(yè)監(jiān)管提供技術(shù)標準支撐,促進行業(yè)的高質(zhì)量發(fā)展。

益生菌產(chǎn)業(yè)研究具有很強的技術(shù)壁壘,作為此次技術(shù)研究的主要參與單位之一,湯臣倍健微生態(tài)研發(fā)中心主任迮曉雷表示,湯臣倍健堅持科學(xué)營養(yǎng)戰(zhàn)略,八年來深入布局益生菌領(lǐng)域,開展菌株篩選、功能評價、產(chǎn)業(yè)應(yīng)用關(guān)鍵技術(shù)及相關(guān)標準研究等,探索技術(shù)創(chuàng)新。未來,湯臣倍健將持續(xù)投入系列復(fù)合菌種鑒定方法研究,加速科研成果在產(chǎn)業(yè)端的轉(zhuǎn)化應(yīng)用。